Jornadas de difusión de proyectos Académicos, de Investigación y Extensión
ESTUDIO FENO GENOTIPICO DE CEPAS DE ESCHERICHIA COLI O157 PRODUCTOR DE TOXINA SHIGA EN MUESTRAS DE AGUAS SUPERFICIALES EXPUESTAS Y NO EXPUESTAS A EFLUENTES DE FEEDLOT EN LA PROVINCIA DE ENTRE RÍOS
PROCURA Francisco; PIAGGIO Mercedes Carolina
Facultad de Bromatología
PROCURA Francisco: franciscoprocura@hotmail.coml
PIAGGIO Mercedes Carolina: mpiaggio@fb.uner.edu.ar
Resumen:
El estiércol bovino puede contener patógenos causantes de enfermedades transmitidas por alimentos (ETA). El más relevante en Argentina es Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC) y dentro de este grupo el serotipo más prevalente es O157:H7/NM. Este serotipo ha sido extensamente asociado al Síndrome Urémico Hemolítico (SUH) post-entérico, enfermedad transmitida por alimentos caracterizada como endémica en Argentina y con un alto impacto en Salud Pública. Aunque se han estudiado diversos vectores como aves e insectos, el agua constituye un importante vehículo para su diseminación.
El objetivo del trabajo fue caracterizar feno genotípicamente los aislamientos de STEC O157 en muestras de aguas superficiales expuestas y no expuestas al detritus de feedlot.
Para esto, entre abril de 2009 y julio de 2011, se tomaron 320 muestras de agua superficial asociadas a 48 feedlots ubicados en 11 departamentos de la provincia de Entre Ríos. A las mismas se les realizó una incubación en medio rico en nutrientes y luego un choque ácido. Seguidamente se les aplicó la técnica de separación inmunomagnética (SIM, Dynal®), sembrando el concentrado en placas de agar MacConkey Sorbitol (SMAC, Biokar), ID O157 Medium™ (ID, Biomerieux), y Chromagar O157 (Chrom, Chromagar). Las colonias presuntivas se repicaron en SMAC y luego, a partir de mezclas de colonias aisladas y de zonas de crecimiento confluente, se realizaron extractos con Tritón 1X. A cada extracto se le practicó, una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) múltiple (genes rfbO157, stx1 y stx2) y se recuperaron cepas de las muestras que exhibieron positividad. La identificación bioquímica de las cepas obtenidas se realizó mediante galerías de pruebas API-20E (BioMerieux). La caracterización genotípica se realizó mediante PCR (genes eae, ehxA, saa, fliCH7), y las variantes de Stx se estudiaron por polimorfismo de longitud de los fragmentos de restricción (PCR-RFLP).
E. coli O157 fue recuperada de los efluentes crudos de feedlot en un 36% de los cuales el 14,7% correspondió a STEC O157, de las lagunas de estabilización en un 39% siendo el 8,5% STEC O157 y de cursos de agua próximos a los establecimientos productores en un 16% de los que el 13.1 % correspondió a STEC O157.
El genotipo prevalente fue stx2 seguido de stx2/stx2c y por ultimo stx1 /stx2 Todas las cepas estudiadas contenían los genes rfbO157, eae, ehxA, y fliCH7 . Todas las cepas STEC O157 aisladas fueron morfologicamente bacilos o cocobacilos gram-negativos, y no se observan diferencias entre las características fenotípicas de las cepas estudiadas, excepto en la sensibilidad a los antibióticos, en el caso particular de amoxilina clabulánico lo cual podría estar relacionado a que este antibiótico es utilizado en los animales en tratamientos de medicina veterinaria.